Abstract:
O glifosato é um herbicida de amplo espectro utilizado nas principais culturas
agrícolas. Este agente pode causar contaminação ambiental em solos, águas
superficiais e subterrâneas, sendo citado pela Agência Internacional de Pesquisa
sobre o Câncer (IARC), como um provável carcinógeno humano. A p53 é conhecida
como proteína supressora tumoral, atuando como um regulador chave da resposta
celular ao estresse e aos danos ao DNA. Por isso, mutações no gene TP53,
codificador da p53, são alterações genéticas comuns encontradas em vários tipos
de câncer. Entre as diversas formulações do glifosato utilizadas no Rio Grande do
Sul (RS, Brasil) se destaca a de nome comercial Roundup Transorb® (RT).
Considerando o uso intenso do glifosato no RS e a falta de conhecimento dos
efeitos e mecanismos celulares e moleculares desta formulação, este estudo teve
por objetivo avaliar a citotoxicidade e genotoxicidade do RT em duas linhagens
celulares de glioblastomas: U87MG (proficiente para p53) e U251MG (mutante para
p53), bem como prospectar as principais proteínas envolvidas à exposição ao RT
no sistema nervoso utilizando a Biologia de Sistemas. Também objetivou-se criar
um produto técnico baseado no Ensaio Cometa, a fim de padronizar por meio de
um protocolo audiovisual. Para a avaliação da citotoxicidade e genotoxicidade o
Ensaio Cometa foi utilizado. Para mineração dos dados ferramentas de
bioinformática como o STRING 11.0 e STITCH 5.0 foram utilizadas, servindo como
base para o desenho das redes binárias no programa Cytoscape 3.6.0. Das
análises dos testes in vitro verificamos a diminuição da viabilidade celular em doses
a partir de 10 ppm, dose considerada segura pela ANVISA e CODEX. Danos ao
DNA foram observados pelo Ensaio Cometa em concentrações a partir de 10 e 30
ppm para as linhagens U251MG e U87MG, respectivamente. Observou-se também
apoptose tanto em células proficientes quanto nas mutantes para TP53. A
citotoxicidade e genotoxicidade foram observadas em ambas linhagens celulares
de maneira dose-dependente de RT. A rede gerada com a biologia de sistemas
mostrou que a presença de p53 é um aliado para a regulação de processos
biológicos de regulação da apoptose neural. Por fim, o produto técnico
desenvolvido é um protocolo audiovisual do Ensaio Cometa disponível no canal do
YouTube da Mutagen-Brasil.
